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          人(human)Apelin肽試劑盒說明書
          更新時間:2011-06-15   點擊次數:1846次

          人(human)Apelin肽試劑盒說明書

           

          本試劑盒僅供研究使用      標本:組織勻漿
           
          一、試 劑 組 成

          精密度微孔板96孔
          Microtitration Strips)
          1塊
          2~8℃干燥保存
          酶標偶合液
          Conjugate )  
          1瓶 12.0毫升
          2~8℃冷藏保存
          標準品
          Standard)
          5瓶 各1.0毫升
          2~8℃冷藏保存
          呈色劑A
          Substrate A)
          1瓶 6.0毫升
          2~8℃避光冷藏保存
          呈色劑B
          Substrate B)
          1瓶 6.0毫升
          2~8℃避光冷藏保存
          終止液
          Stopping Solution)
          1瓶 6.0毫升
          室溫保存
          20倍濃縮洗滌液
          Rinsing Buffer x 20
          1瓶 60.0毫升
          2~8℃冷藏保存
          5倍濃縮樣品稀釋液
          Diluent x 5
          1瓶 15.0ml
          2~8℃冷藏保存
          英文說明書,中文說明書
           
          各一份
          室溫保存

           
          二、注意事項
          1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
          2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
          3. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
          4. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
          5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
          6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
          7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
          8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
           
          三、實驗前準備
          1使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
          2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等
          3濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
          4濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
          5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
           
          四、操 作 步 驟
          1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代)
          2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
          3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
          4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;
          5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
          6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
          7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
          8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
          9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。
          10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
          11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
          12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
          13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
          14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
          15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。
          16、根據制備的標準曲線,計算樣本含量
           
          五、結 果 判 斷
          1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
          2、檢測值范圍:0-800pg/ml
          3、敏感度:1.0pg/ml
           
           

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