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          尿素瓊脂培養基基礎
          更新時間:2016-06-01   點擊次數:975次

          用途:

             用于鑒別腸道菌尿素酶試驗 (GB4789.4-2010,《中華人民共和國藥典》2010年版,SN0170-92和GB13091-91,ISO標準)。

          原理:

             蛋白胨提供碳源和氮源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀是緩沖劑;具有尿素酶的細菌分解培養基中的尿素,產生大量的氨,使培養呈堿性,酚紅指示劑在pH6.8時呈黃色,pH8.1呈粉紅色;瓊脂是培養基的凝固劑。

          配方(每升):

            蛋白胨 1g

            氯化鈉 5g

            葡萄糖 1g

            磷酸二氫鉀 2g

            酚紅 0.012g

            瓊脂 12g

            zui終pH7.2±0.2

           使用方法:

            1、 稱取本品21g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,待冷卻至50—55℃,每200mL培養基加入經過濾除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL,尿素的zui終濃度為2%。分裝無菌試管,制成斜面。

            2、 挑取待檢菌的新鮮純培養物,濃密地涂布在尿素瓊脂斜面上,置36±1℃培養24h。

            3、 于2—4h及24h各觀察一次結果。培養基呈現紅色時為陽性反應,顏色不變者為陰性反應。如為陰性可繼續培養觀察至4d。

          質量控制:

           質控菌株接種后于36±1℃培養24h結果如下 :

           菌    名          菌    號      生長狀況         培養特征

           普通變形桿菌        HK7131         良好         培養基變紅色

           大腸埃希氏菌       ATCC25922       良好         培養基不變色

            貯    存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

            規    格:250g

           

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