抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒

商品詳情：
抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒測定意義：

AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶"家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的細(xì)胞色素b還原，該過程中電子的跨膜運輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長。

測定原理：

AAO可直接氧化AsA，通過測定AsA的氧化量，可計算得AAO活力。

實驗中所需儀器及設(shè)備：

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3.血清等液體：直接檢測。

計算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:

（1）按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：

單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

注意事項：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

N-乙酰轉(zhuǎn)移酶10ELISA試劑盒 NAT10免費代測試劑

N-乙酰神經(jīng)氨酰合酶ELISA試劑盒 NANS免費代測試劑

N-乙酰葡糖胺激酶ELISA試劑盒 NAGK免費代測試劑

N-乙酰硫酯酶ELISA試劑盒 GAS免費代測試劑

N-乙酰合酶ELISA試劑盒 NAGS免費代測試劑

N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶ELISA試劑盒 NAGLU免費代測試劑

N-酰基乙chun胺酰化酶ELISA試劑盒 NAAA免費代測試劑

N-酰基鞘氨chun酰胺水解酶2ELISA試劑盒 ASAH2免費代測試劑

N-酰基鞘氨chun酰胺水解酶1ELISA試劑盒 ASAH1免費代測試劑

N-肉豆蔻酰基轉(zhuǎn)移酶2ELISA試劑盒 NMT2免費代測試劑

N-肉豆蔻酰基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 NMT1免費代測試劑

N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶4ELISA試劑盒 NDST4免費代測試劑

N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶3ELISA試劑盒 NDST3免費代測試劑

N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶2ELISA試劑盒 NDST2免費代測試劑

N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶1ELISA試劑盒 NDST1免費代測試劑
抗壞血酸氧化酶(AAO)測試盒100管/96樣苯解氨酶(PAL)試劑盒/微量法

50管/24樣吡咯啉-5-羧還原酶(P5CR)測試盒/分光光度法

100管/96樣吡咯啉-5-羧還原酶（P5CR）測試盒/微量法

50管/24樣吡咯啉-5-羧合成酶(P5CS)測試盒/分光光度法

100管/48樣吡咯啉-5-羧合成酶(P5CS)測試盒/微量法

50管/48樣丙二醛(MDA)測試盒/TBA法

50管/48樣丙酮(PA)含量測試盒/分光光度法

100管/96樣丙酮(PA)含量測試盒/微量法

50管/48樣丙酮測試盒/比色法