β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測(cè)試盒

商品詳情：
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測(cè)試盒測(cè)定意義：                          

β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下，可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性測(cè)定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。

測(cè)定原理：

β-1,3-GA水解昆布多糖，內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵，產(chǎn)生還原末端，通過(guò)測(cè)定還原糖生成速率來(lái)計(jì)算其酶活性。

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

CD134分子ELISA試劑盒 CD134免費(fèi)代測(cè)試劑

CD10分子ELISA試劑盒 CD10免費(fèi)代測(cè)試劑

CC趨化因子受體7ELISA試劑盒 CCR7免費(fèi)代測(cè)試劑

CC趨化因子受體5ELISA試劑盒 CCR5免費(fèi)代測(cè)試劑

CC趨化因子受體1ELISA試劑盒 CCR1免費(fèi)代測(cè)試劑

CC趨化因子7ELISA試劑盒 CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7免費(fèi)代測(cè)試劑

CC趨化因子5ELISA試劑盒 CCL5/D17S136E/SCYA5免費(fèi)代測(cè)試劑

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白εELISA試劑盒 C/EBPε免費(fèi)代測(cè)試劑

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δELISA試劑盒 C/EBPδ免費(fèi)代測(cè)試劑

cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷二酯酶10AELISA試劑盒 PDE10A免費(fèi)代測(cè)試劑

Ca2+激活K+通道蛋白2ELISA試劑盒 KCNN2免費(fèi)代測(cè)試劑

C4結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 C4BP免費(fèi)代測(cè)試劑

C1q/TNF相關(guān)蛋白3ELISA試劑盒 Cartonectin/CTRP3/CORS-26免費(fèi)代測(cè)試劑

B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31ELISA試劑盒 BCAP31免費(fèi)代測(cè)試劑

B細(xì)胞受體ELISA試劑盒 BCR免費(fèi)代測(cè)試劑
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測(cè)試盒過(guò)氧化氫（H2O2）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

過(guò)氧化氫（H2O2）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

線粒體活性氧產(chǎn)生速率（ROS）比色法檢測(cè)試劑盒熒光法100管/96樣

脂質(zhì)過(guò)氧化物（LPO）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

脂質(zhì)過(guò)氧化物（LPO）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

丙二醛（MDA）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

丙二醛（MDA）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

氧化酶（XOD）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

氧化酶（XOD）比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣